Validación de un método para la determinación de flavonoides y metilxantinas por cromatografía liquida de alta eficiencia - aplicación en el análisis de grano de cacao

Abstract

Se validó un método para la determinación de flavonoides y metilxantinas, para lograr analizar los diferentes genotipos de cacao incorporados en el país. En este trabajo se analizó el contenido de los flavonoides catequina, epicatequina, procianidina B1 y procianidina B2, además de las metilxantinas teobromina y cafeína. Para determinar la concentración de los polifenoles y las metilxantinas, fue necesario estandarizar un método de análisis por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC), que permitiera la determinación simultánea de los seis analitos de interés, cumpliendo en todos los casos con lo establecido por las Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL). Es importante resaltar que la temperatura fue uno de los mayores inconvenientes en este método, además de la radiación UV proveniente de lámparas y de la luz solar y la presencia de oxígeno. Debido a esto, se almacenaron las muestras en frascos ámbar, en atmósfera de nitrógeno y a una temperatura de -20°C. Se determinó que durante el proceso de fermentación del grano, éste pierde sus propiedades antioxidantes, es decir, disminuye la concentración de los flavonoides, con respecto al grano verde, siendo de gran utilidad esta información para mejorar este proceso. Los análisis fueron efectuados tanto para genotipos de cacao verde, como de cacao fermentado y seco. De esta forma se contribuyó al desarrollo de las fichas técnicas de los materiales promisorios que fueron estudiados por la UIS y Fedecacao.