Incremento de la producción de hidrogeno por mutagénesis química y recombinación genética de la escherichia coli

Abstract

Con el objetivo de incrementar la producción de hidrógeno por medios biológicos bajo condiciones anaeróbicas a partir de formato se realizó manipulación genética a través de mutagénesis química y recombinación genética de la batería Escherichia coli K12-BW25113 hyaB hybC hycA fdoG/ pCA24N-FhlA. Como resultado de la mutagenesis química se encontraron 3 mutantes que incrementaron la producción de hidrógeno. Posteriormente a estas tres mutantes se les realizó recombinación genética por medio de la fusión de sus protoplastos para aumentar el potencial de producción de hidrógeno y se encontraron dos mutantes que incrementaron su producción aproximadamente 3.0 y 8.0 veces más que la cepa original. La producción de hidrógeno se midió a una hora y tres horas de incubación y se encontró mayor producción de hidrógeno después de 1 hora de incubación. Se realizaron tres experimentos diferentes para calcular la producción de hidrógeno, un sistema abierto LPP ensayo de baja presión parcial) y dos sistemas cerrados (método corto y método largo). La determinación de hidrógeno cuantitativa se hizo utilizando cromatografía de gases y una relación matemática donde se tuvo en cuenta la densidad óptica, la cantidad total de proteína, el cultivo y el volumen de muestra analizado.