Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)Ortiz López, Claudia CristinaFernández Lafuente, RobertoTorres Sáez, Rodrigo GonzaloRueda Arango, Nazzoly2024-03-0320162024-03-0320162016https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/35547Las enzimas son biocatalizadores muy útiles, aunque en la mayoría de los casos deben ser mejoradas para su aplicación industrial. Por ejemplo, es preciso inmovilizarlas para su fácil recuperación y posible reuso. Esta necesidad ha hecho que la inmovilización se utilice para mejorar otras propiedades de las enzimas. Entre las enzimas más utilizadas destacan las lipasas. Las lipasas mantienen un equilibrio entre dos diferentes estructuras conformacionales, una abierta y la otra cerrada, donde el centro activo puede estar aislado del medio mediante una cadena polipeptídica. La forma abierta es inestable en medio acuoso, pero es estabilizada mediante adsorción sobre cualquier superficie hidrofóbica. Esto ha permitido que las lipasas se inmovilicen, purifiquen, hiperactiven y estabilicen por inmovilización reversible sobre soportes hidrofóbicos, como por ejemplo perlas de octil-agarosa. A pesar de su utilidad, este soporte, libera la enzima en condiciones drásticas de operación, limitando su utilidad. En consecuencia, en este trabajo de tesis doctoral, se diseñó un nuevo soporte heterofuncional (octil-glioxil agarosa), mediante la oxidación directa de los dioles presentes en el soporte comercial octil-agarosa, para generar uniones covalentes que impidan la desorción y lograr la estabilización de las lipasas. Se evaluaron las condiciones óptimas de inmovilización sobre este nuevo soporte y se dio solución a problemas generados durante el proceso mediante la modificación química en fase sólida de las lipasas y el uso de sales como agentes estabilizantes. Los resultados obtenidos mostraron que los biocatalizadores inmovilizados sobre el nuevo soporte heterofuncional mejoraron significativamente las propiedades biocatalíticas de las enzimas comparadas con los respectivos soportes monofuncionales.application/pdfspahttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/Soportes HeterofuncionalesInmovilizaciónLipasasModificación QuímicaReactivaciónCationesDesplegamiento/Replegamiento.Universidad Industrial de SantanderTesis/Trabajo de grado - Monografía - DoctoradoUniversidad Industrial de Santanderhttps://noesis.uis.edu.coEnzymes are very useful biocatalystsalthough in most cases they should be improved for their industrial application. For instanceit is necessary to immobilize them for their recovery and possible reuse. This need has made that the immobilization is used to improve some properties of the enzymes. Among the most commonly used enzymeslipases are included. Lipases keep a balance between two different conformational structuresone open and the other one closedwherein the active center can be isolated from the means by a polypeptide chain. The open form is unstable in aqueous meansbut is stabilized by adsorption on any hydrophobic surface. This has allowed that lipases are immobilizedpurifiedhyperactivated and stabilized by reversible immobilization on hydrophobic supportssuch as octyl-agarose beads. Despite of its usefulnessthis support also releases the enzyme in drastic operating conditions limiting its use. Consequentlyin this doctoral thesisa new heterofunctional support (octyl-glyoxyl agarose) was designedby the direct oxidation of the diols present in the octyl-agarose commercial supportin order to generate some covalent linkages that avoid desorption and achieve stabilization of immobilized lipases. The optimal conditions for the immobilization of each lipase on this new support were evaluated and some of the problems generated during the immobilization process were solved by using a solid-phase chemical modification of lipases and using some salts as stabilizing agents. The results showed that new biocatalysts immobilized on the new hetero-functional support significantly improved the biocatalytic properties of enzymes compared to monofunctional supports.info:eu-repo/semantics/openAccessAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)