Detección de L-DOPA utilizando peroxidasa de pasto guinea (Panicum maximum) inmovilizada sobre electrodos modificados con nanopartículas de oro

Abstract

La enfermedad de Parkinson es un trastorno neurodegenerativo crónico y progresivo causado por la deficiencia de dopamina en el sistema nervioso central, cuyo tratamiento farmacológico de primera línea es la levodopa (LD). Dado que su manejo clínico requiere un monitoreo continuo de los niveles del fármaco en matrices biológicas, y que los métodos analíticos convencionales como el HPLC presentan limitaciones de costo y accesibilidad, en el presente trabajo se desarrolló y caracterizó un biosensor electroquímico basado en un electrodo serigrafiado de oro (Au-SPCE) modificado con la peroxidasa de pasto guinea (Panicum maximum, PPG) para la detección de LD.

La extracción y purificación parcial de la PPG se realizó a partir de una incubación en buffer fosfato (PB) a pH 7, seguida de centrifugación para la eliminación de residuos, fraccionamiento mediante sistema de reparto bifásico acuoso con polietilenglicol (PEG) al 14% y sulfato de amonio (NH₄)₂SO₄ al 10% y ultrafiltración con membranas Amicon de 30 kDa, obteniéndose una actividad específica de 223,3 U/mg.

La evaluación electroquímica del electrodo Au-SPCE permitió identificar una señal de oxidación de la levodopa alrededor de +0,18 V. La incorporación de PPG y H₂O₂ modificó la respuesta voltamétrica, evidenciando la participación del componente enzimático en el proceso de detección. El potencial obtenido fue comparable e incluso ligeramente inferior al reportado para otros sistemas de detección de levodopa, lo que destaca el potencial del sistema desarrollado como alternativa para su detección electroquímica.