Implementación y validación de un método para la determinación de vitaminas hidrosolubles en leche por cromatografía liquida de alta eficiencia

Abstract

En la presente investigación se implementaron y validaron dos metodologías por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC), una, para la identificación y cuantificación simultánea de tiamina, riboflavina, ácido nicotínico, nicotinamida, ácido pantoténico, piridoxina, ácido fólico y cianocobalamina y otra para el análisis de Ácido L-ascórbico (AA) implementando una reacción de reducción previa al análisis cromatográfico para convertir el ácido dehidroascórbico en AA utilizando L-cisteína como agente reductor. La cuantificación de las 8 vitaminas hidrosolubles se realizó en tres muestras de leche comercial y una de leche materna. La cuantificación del AA se realizó en una muestra de leche, un jugo de naranja y un suplemento vitamínico. Para el proceso de extracción simultánea de las 8 vitaminas hidrosolubles se evaluaron 3 pH diferentes. Los resultados determinaron que a pH 4 se obtuvo la recuperación más alta de las vitaminas hidrosolubles. A continuación, se procedió a realizar la validación de los métodos implementados determinando las figuras de merito analíticas. Los resultados permitieron concluir que los métodos son repetibles y reproducibles; Además presentaron coeficientes de determinación R2 > 0,999; con porcentajes de recuperación entre 89 % y 110%, excepto para el ácido fólico (