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Espectroscopia de capacitancia electroquímica en la determinación de la afinidad de interacción de fármacos antimitóticos con b-tubulina

Resumen

Se diseñó, implementó y evaluó un sensor para cuantificar la interacción de fármacos antimitóticos con 3-Tubulina, basado en la determinación experimental de la dureza química porEspectroscopia de Capacitancia Electroquímica (ECE). El sensor desarrollado utiliza como receptor 8-Tubulina inmovilizada en una monocapa mixta de 11ferrocenil-1-undecanotiol y ácido 16-Mercaptohexadecanoico autoensamblada sobre un sustrato deoro, el cual funciona como electrodo de trabajo en una celda electroquímica de tres puntas, juntocon un electrodo de referencia de 4g/4gC!1 3 [M] y un contraelectrodo de platino. La evaluación delsensor se llevó a cabo midiendo el espectro de capacitancia electroquímica con diferentes concentraciones de tres fármacos antimitóticos ampliamente utilizados en el tratamiento de cáncer: Paclitaxel,Docetaxel y Epotilona B. La dureza química se obtuvo como el inverso de la distancia entre los cortescon las abscisas del las gráficas de Nyquist de capacitancia. Los datos obtenidos se parametrizaron, graficaron y analizaron por medio de algoritmos desarrollados en lenguaje Python y organizadosen un Jupyter Notebook. Se calibró el sensor por medio de curvas analíticas construidas por dosmétodos diferentes, para el primero se utilizó la dureza química y para el segundo, se definió la dureza química efectiva, con la cual, se logró reducir la dependencia de la medida del sensor de lascondiciones de la superficie de interacción, mejorando su capacidad de detección. Se estimó la afinidad 5-Tubulina - fármaco por medio de las isotermas de Freundlich. Los valores obtenidos para laconstante de Freundlich están en el rango 28.20 [nM] < Ky < 57.93 [nM]. Se obtuvieron límites de detección LOD y cuantificación LOQ menores a 30 [nM] y 97 [nM] respectivamente.