Immobilization of lipases on glyoxyl-octyl supports: improved stability and reactivation strategies

Suescun Padilla, Angelica Maria

Publicación:
Immobilization of lipases on glyoxyl-octyl supports: improved stability and reactivation strategies

dc.contributor.advisor	Castillo León, John Jairo
dc.contributor.advisor	Rueda Arango, Nazzoly
dc.contributor.author	Suescun Padilla, Angelica Maria
dc.date.accessioned	2024-03-03T22:16:31Z
dc.date.available	2015
dc.date.available	2024-03-03T22:16:31Z
dc.date.created	2015
dc.date.issued	2015
dc.description.abstract	Las lipasas candida rugosa (CRL) y candida antárctica (isoforma a) (CAL A) se han inmovilizado con éxito sobre el soporte heterofuncional octil glioxil agarosa (OCGLX) en comparación con el soporte octil agarosa (OC) y glioxil agarosa (GLX). La inmovilización sobre OCGLX permitió obtener hiperactivaciones similares a las encontradas sobre los soportes OC, aunque la incubación a pH 10.0 durante 4 h disminuyó la actividad de ambas enzimas a un 25%. Después de la reducción, más del 95% de la actividad de la enzima se unió covalentemente al soporte. La fracción no unida covalentemente se desorbió por lavado con detergente. Estos biocatalizadores fueron más estables que sus homólogos inmovilizados sobre OC en las inactivaciones térmicas y en solventes orgánicos. Aún más interesante es que la inmovilización irreversible permite la reactivación de los biocatalizadores de CAL A inactivados por incubación en solvente orgánico, después del desplegamiento de la enzima en presencia con guanidina y de replegamiento en tampón fosfato de potasio (alrededor del 55% de la actividad logró ser recuperada durante 3 ciclos sucesivos de desplegamiento/replegamiento). Por su parte GLXCAL A permitió recuperar el 75% de la actividad, pero la estabilidad térmica y la actividad fue mucho más baja, además esta estrategia no se pudo aplicar a CRL. Ni la enzima inmovilizada sobre bromuro de cianógeno ni sobre OCGLX exhibió actividad significativa después de utilizar las estrategias de despliegamiento/replegamiento.
dc.description.abstractenglish	Lipases from Candida rugosa (CRL) and from C. antarctica (isoform A) (CALA) have been successfully immobilized on octyl-glyoxyl agarose (OCGLX) beads and compared to the octyl-agarose (OC) or glyoxyl (GLX) beads immobilized counterparts. Immobilization on OCGLX gave similar hyperactivations than those found for the immobilization on OC supports, although the incubation at pH 10.0 for 4 h decreased the activity of both enzymes by 25%. After reduction, more than 95% of the enzyme activity was covalently attached to the support. The fraction not covalently attached was desorbed by washing with detergent. These biocatalysts were more stable than the octyl counterparts in thermal or organic solvent inactivation. More interestingly, the irreversible immobilization permitted the reactivation of CALA biocatalysts inactivated by incubation in organic solvent, after unfolding in the presence of guanidine and refolding in aqueous buffer (around 55% of the activity could be recovered during 3 successive cycles of inactivation/reactivation). GLX-CALA permitted to recover 75% of the activity, but the thermal stability and activity was much lower, and this strategy could not be applied to CRL. Neither the enzyme immobilized on cyanogen bromide nor the enzyme immobilized on OCGLX exhibited significant activity after the unfolding/refolding strategy.
dc.description.degreelevel	Pregrado
dc.description.degreename	Químico
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.identifier.instname	Universidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponame	Universidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourl	https://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.uri	https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/33616
dc.language.iso	spa
dc.publisher	Universidad Industrial de Santander
dc.publisher.faculty	Facultad de Ciencias
dc.publisher.program	Química
dc.publisher.school	Escuela de Química
dc.rights	http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.rights.accessrights	info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.creativecommons	Atribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
dc.rights.license	Attribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0
dc.subject	Inmovilización De Lipasas Mediante Activación Interfacial
dc.subject	Estabilización De Enzimas
dc.subject	Inmovilización Covalente
dc.subject	Reactivación Enzimática
dc.subject	Desplegamiento/Replegamiento.
dc.subject.keyword	Immobilization Of Lipases Via Interfacial Activation
dc.subject.keyword	Enzyme Stabilization
dc.subject.keyword	Covalent Immobilization
dc.subject.keyword	Enzyme Reactivation
dc.subject.keyword	Unfolding/Refolding.
dc.title	Immobilization of lipases on glyoxyl-octyl supports: improved stability and reactivation strategies
dc.title.english	Immobilization of lipases on glyoxyl-octyl supports: improved stability and reactivation strategies
dc.type.coar	http://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.hasversion	http://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.local	Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
dspace.entity.type	Publication