Espectroscopia de capacitancia electroquímica en la determinación de la afinidad de interacción de fármacos antimitóticos con β-Tubulina

Abstract
Se diseñó, implementó y evaluó un sensor para cuantificar la interacción de fármacos antimitóticos con β-Tubulina, basado en la determinación experimental de la dureza química por Espectroscopia de Capacitancia Electroquímica (ECE). El sensor desarrollado utiliza como receptor β-Tubulina inmovilizada en una monocapa mixta de 11- ferrocenil-1-undecanotiol y ácido 16-Mercaptohexadecanoico autoensamblada sobre un sustrato de oro, el cual funciona como electrodo de trabajo en una celda electroquímica de tres puntas, junto con un electrodo de referencia de Ag/AgCl 3 [M ] y un contraelectrodo de platino. La evaluación del sensor se llevó a cabo midiendo el espectro de capacitancia electroquímica con diferentes concentra- ciones de tres fármacos antimitóticos ampliamente utilizados en el tratamiento de cáncer: Paclitaxel, Docetaxel y Epotilona B. La dureza química se obtuvo como el inverso de la distancia entre los cortes con las abscisas del las gráficas de Nyquist de capacitancia. Los datos obtenidos se parametrizaron, graficaron y analizaron por medio de algoritmos desarrollados en lenguaje Python y organizados en un Jupyter Notebook. Se calibró el sensor por medio de curvas analíticas construidas por dos métodos diferentes, para el primero se utilizó la dureza química y para el segundo, se definió la dureza química efectiva, con la cual, se logró reducir la dependencia de la medida del sensor de las condiciones de la superficie de interacción, mejorando su capacidad de detección. Se estimó la afinidad β-Tubulina - fármaco por medio de las isotermas de Freundlich. Los valores obtenidos para la constante de Freundlich están en el rango 28.20 [nM ] ≤ Kf ≤ 57.93 [nM ]. Se obtuvieron límites de detección LOD y cuantificación LOQ menores a 30 [nM ] y 97 [nM ] respectivamente.
Description
Keywords
Monocapas, Dureza Química, Sensores, Antimitóticos
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