Expresión gus en explantes de solanum phureja (juz. et. buk) var. criolla Colombia, transformados con agrobacterium tumefaciens

Abstract

La expresión transitoria y estable del gen gusA-intron en explantes internodales de Papa criolla var. Criolla Colombia cocultivados con Agrobacterium tumefaciens es reportada. Con el fin de determinar la susceptibilidad de esta variedad a la transformación mediada por A. tumefaciens, explantes internodales de Solanum phureja fueron infectados con la cepa LBA4404 de A. tumefaciens que contiene el plásmido pCAMBIA2301. Este plásmido contiene el gen de resistencia a kanamicina ntpII y el gen reportero gusA-intron. La selección de los explantes potencialmente transgénicos fue realizada en medios con kanamicina. La eficiencia de transformación estable y transitoria fue calculada con base en la actividad GUS (ß-glucuronidasa), detectada por el ensayo histoquímico X-gluc. La expresión transitoria y estable del gen gusA-intron fue observada en células del explante más bien que en tejidos completos. La eficiencia de transformación estable y transitoria obtenida fue del 6%. El porcentaje de regeneración fue bajo en comparación a los porcentajes reportados para Papa de año (Solanum tuberosum). No obstante el uso de explantes en buen estado fisiológico y el control de las condiciones de temperatura, humedad y luminosidad durante el proceso de regeneración puede incrementar el porcentaje de regeneración en esta nueva variedad. Estos resultados demuestran que la Papa criolla (S. phureja Juz. et. Buk) variedad Criolla Colombia es susceptible a la infección por A. tumefaciens y apropiada para realizar ensayos de transformación genética