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AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE CEPAS ENDEMICAS DE Bacillus fhuringiensis DE LA MESA DE LOS SANTOS (S) Y ESTUDIO DE SU ACTIVIDAD INSECTICIDA EN LARVAS DE Musca domestica

Resumen

Bacillus fhuringiensis (Bt), es una bacteria que en el proceso de esporulación produce cristales paraesporales con actividad tóxica contra diferentes órdenes de insectos. Varias subespecies de Bt se distribuyen comercialmente para el control de insectos plaga tales como Aedes aegypti (dípteros). HeJiofhis virescens (lepidópteros) y algunas especies de coleópteros. No obstante. aún no se han aislado cepas de St tóxicas contra larvas de Musca domestica por lo cual se persiste en el uso preferencial de insecticidas químicos. Durante la realización de este proyecto se colectaron muestras de suelo de los sectores I y 11 de la Mesa de los Santos (S). seleccionando esporas bacterianas a través de cultivo en caldo Luria Bertani (LB) con tampón de Acetato de Sodio 0.25 M. Aislándose en total 125 colonias bacterianas con morfología de bacilo, Gram (+), formadoras de esporas y cuatro de ellas (SilEI. Bt 26, 27.67. 88) mostraron inclusión cristalina paraesporal. Estas cepas fueron caracterizadas bioquímicamente usando el test BBL- Crystal GP. Beckton-Dickinson y las pruebas de Finegold & Martin, 1989. Además fueron caracterizadas molecularmente usando electroforesis de proteínas en gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e Inmunoblotting con anticuerpos pOllclonales de ratón anti-proteinas cristal de St. subsp. israelensis (CIB) mostrando la presencia de proteínas tipo Cry. Se realizó un bioensayo para estudiar de forma preliminar la actividad tóxica de las cepas SilEI.Bt contra larvas de Musca domestica, utilizando polvo liofilizado esporacristal en concentraciones de 0.5 mg/ml y 1 mg/ml. Bajo las condiciones ensayadas no se reportó toxicidad significativa. Se usó como control positivo St. subsp. darmstadiensis, la cual mostró los mismos resultados. Finalmente se constituyó un banco de cepas bacterianas formadoras de esporas, Bacillus spp, Iniciándose la colección de Bt en la Universidad Industrial de Santander, Colombia.