Expresión diferencial entre fenotipos sensible y resistente "in vitro" a benznidazol de estadios de t.cruzi i

Abstract

El tratamiento de la Enfermedad de Chagas cuenta con solo dos fármacos: Nifurtimox y Benznidazol, los cuales son efectivos en un 70% en fase aguda de la enfermedad, sin embargo en fase crónica no ha sido completamente establecida su utilidad. Adicionalmente, estos fármacos presentan efectos secundarios adversos, eficacia terapéutica variable y se ha reportado cepas de T. cruzi naturalmente resistentes al tratamiento, hecho que resalta la importancia de la búsqueda de blancos terapéuticos que permitan el diseño de fármacos alternativos. Teniendo en cuenta que se conocen parcialmente los mecanismos moleculares de T. cruzi responsables de la resistencia al Benznidazol en epimastigotes, en este estudio se realizó un análisis comparativo de expresión génica entre un aislado de T. cruzi I al Benznidazol y el aislado susceptible de los estadios de amastigote, tripomastigote metacíclico y sanguíneo, formas del parásito que están directamente relacionadas con el hombre y que son los principales blancos de acción del fármaco. Este análisis se realizó utilizando la técnica de electroforesis en dos dimensiones (EF- 2D) y espectrometría de masa tipo MALDI-TOF/TOF. En general, los geles del fenotipo sensible y resistente mostraron un promedio de 117 manchas peptídicas, detectándose expresión diferencial de 7 manchas en los estadios de amastigote y tripomastigote sanguíneo y 10 en tripomastigote metacíclico. En total 24 proteínas fueron identificadas por espectrometría de masas y agrupadas en tres categorías funcionales relacionadas con el metabolismo del parásito, ensamblaje de citoesqueleto y defensa celular. Las proteínas triparedoxina, triparedoxina peroxidasa, biosíntesis lipofosfoglican, proteína de choque térmico 83, adenilato quinasa, tubulina beta y barra paraflagelar tuvieron expresión diferencial en el fenotipo resistente y dado su papel en la protección de T. cruzi de los efectos citotóxicos producidos por el fármaco podrían estar implicadas en el mecanismo de resistencia a Benznidazol.