Cálculo de la eficiencia de la extracción de metabolitos derivados del indol empleando un sistema metanol/agua/cloroformo

Abstract

La metabolómica es en la actualidad un área de investigación con grandes ventajas, entre las cuales sobre salen la alta conectividad entre los metabolitos y que su número es menor respecto a los genes y proteínas, por lo cual la complejidad de la muestra se ve reducida, además los cambios en las expresiones genéticas y protéicas se ven amplificados a nivel metabólico; pero es un campo que necesita optimizar los pasos fundamentales en él. La extracción de metabolitos en diferentes muestras biológicas es probablemente el proceso más importante, ya que afecta tanto el número de metabolitos recuperados como la reproducibilidad y la confianza en los datos obtenidos. Teniendo en cuenta las diferentes características físico-químicas que presentan los metabolitos; la escogencia de los solventes adecuados, sus cantidades y proporciones, representan un importante reto para los investigadores. En este trabajo se evaluó la eficiencia del proceso de extracción de 5 metabolitos, indol, indol-3-acetato, indol-3-acetamida, triptamina e hidroxi-indol, empleando metanol, agua y cloroformo como solventes, para obtener un sistema de 2 fases, polar y orgánica. Una vez analizadas las muestras presentes en la fase polar empleando un espectrómetro de masas, se determinó que el protocolo de extracción empleado es adecuado para la triptamina, el indol-3-acetato y el indol-3-acetamida, gracias a sus valores de eficiencia; se evidencia que las condiciones de almacenamiento de las muestras previas a su análisis y la cantidad de solvente empleado afectan en mayor medida a los metabolitos más hidrofóbicos (Indol e hidroxi-indol) y son éstos mismos los que presentan una menor eficiencia. Finalmente se calculó el coeficiente de distribución de los metabolitos, que es propio de los solventes y condiciones empleadas y al ser comparado con el coeficiente de reparto de los mismos se observan grandes similitudes cualitativas.