Influencia de las mutaciones en los genes uvra, recj, y recn sobre la restauración de la division celular en celulas de escherichia coli tratadas con radiación ultravioleta

Abstract

Cuando Escherichia coli es tratada con radiación ultravioleta, se detiene la replicación del ADN y división celular. La restauración de estos procesos, involucra cambios importantes de organización cromosómica que son dependientes de la proteína RecN. Recientemente, nuestro grupo mostró que cepas de E. coli uvrA y recJ son hipersensibles a la UVB. En el presente trabajo se evaluó la importancia de RecN, UvrA y RecJ sobre la restauración de la división celular post-irradiación. Asimismo, se evaluó el potencial efecto modulador de diferentes compuestos terpénicos y flavonoides sobre la organización del nucleoide post-irradiación. Para ello, usamos estirpes con mutaciones en los genes en cuestión y estudiamos sus cinéticas post-irradiativas de los morfotipos del nucleoide, mediante tinción fluorescente. A continuación, en tratamientos simples y con irradiación evaluamos la influencia de los diferentes compuestos sobre el nucleoide. En la cinética del genotipo salvaje primero incrementó el morfotipo compactado del nucleoide (15-30 min); luego el extendido (30-60 min), y finalmente, el bilobulado (60-120 min). Dicha dinámica fue modificada en las cepas uvrA y recJ; retardándose la compactación hasta los 45 y 60 min, respectivamente, para luego incrementarse el morfotipo extendido; morfotipo fielmente relacionado con el proceso de filamentación celular. Por su parte, la estirpe recN no mostró incrementos del morfotipo compactada en toda su cinética post-irradiativa. En la segunda parte del estudio, evidenciamos diferencias en las frecuencias de los morfotipos del nucleoide de E. coli en los distintos tratamientos. En conclusión, la restauración de la división celular post-irradiación se caracteriza por una dinámica re-organizativa de compactación, des-compactación y restauración de la división. Dicha dinámica se vio modificada en cada mutante, demostrándose la importancia de uvrA y recJ en la restauración de la división celular y de recN en la compactación del nucleoide. Finalmente, es evidenciado el efecto modulador del nucleoide de los compuestos evaluados.