Este trabajo evaluó y comparó métodos de extracción de compuestos bioactivos en maíz amarillo, con el fin de aprovecharlos como pigmentos naturales en la industria avícola. Se aplicó una mezcla de acetonitrilo/metanol (70:30, v/v) en la extracción asistida por ultrasonido y en la dispersión de la matriz en fase sólida (MSPD). Los resultados evidenciaron que la sonicación alcanzó mayores rendimientos (3,1–3,7%) frente a MSPD (2,4–2,8%), demostrando su mayor eficiencia en la recuperación de carotenoides. El análisis mediante UHPLC/ESI-Q-Orbitrap-MS permitió identificar luteína, sus isómeros y β-criptoxantina, con tiempos de retención de 4,5–8,7 min y desviaciones menores de 5 ppm, lo que respaldó la fiabilidad del método. La cuantificación mostró alta sensibilidad (R² = 0,9959; LOD = 0,053 mg/L; LOQ = 0,161 mg/L) y una concentración de luteína de 48,6 mg/kg, aproximadamente 4,4 veces superior a la obtenida con métodos alternativos. La separación cromatográfica mediante prep-HPLC generó fracciones enriquecidas en luteína, cuya identidad fue confirmada por HPLC/DAD (UV-Vis a 240 y 450 nm) y UHPLC/Orbitrap-MS, validando la eficacia del proceso de extracción y purificación propuesto.