Estandarización del método de Lugol-carbohidrato para la evaluación de la actividad enzimática de α-amilasa de Zea mays L.

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dc.contributor.advisorDaza Espinosa, Martha Cecilia
dc.contributor.advisorHidalgo Bucheli, William Fernando
dc.contributor.authorDíaz Quintanilla, María Camila
dc.contributor.authorGelves Abril, Astrid Carolina
dc.contributor.evaluatorMéndez Sánchez, Stelia Carolina
dc.contributor.evaluatorCano Calle, Hermínsul de Jesús
dc.date.accessioned2022-06-08T11:50:11Z
dc.date.available2022-06-08T11:50:11Z
dc.date.created2021
dc.date.issued2021
dc.description.abstractLa enzima α-amilasa representa cerca del 25-30% de la producción total de enzimas en el mundo y al igual que el almidón, es ampliamente empleada en industrias de alimentos, papel, textil, de detergentes, entre otras. En este trabajo se llevó a cabo la estandarización del método de Lugol para la determinación de la actividad enzimática de α-amilasa por medio de espectroscopia UV[1]Vis. Para ello, se realizó el estudio de la preparación del reactivo de Lugol, el complejo yodo[1]almidón y la linealidad de los mismos; por lo tanto, la curva de calibración se elaboró utilizando 10µL del reactivo de Lugol a una concentración de yodo igual a 0.658 M (1,5 %p/v de I2 y 10%p/v de KI) y 2.99 mL de soluciones de almidón a concentraciones 0,0025, 0,005, 0,0075, 0,01 %p/v, elaboradas a partir de una solución madre 0,02 %p/v; la medición de la absorbancia se realizó a 570 nm. Por consiguiente, se efectúo la extracción de la enzima α-amilasa de granos de Zea Mays L ICA V-305 y se utilizó 1 mL de dicho extracto crudo, con una concentración de proteínas de 12,51 µg/mL, para evaluar el efecto del pH y la temperatura, en consecuencia, se obtuvo un pH y temperatura óptima de 6 y 80°C, respectivamente. Además, a sus condiciones óptimas, se evaluaron las constantes cinéticas Km y Vmáx, para las cuales se obtuvo un valor de 0,04624 %p/v y 1,497 %p/v.min-1 , respectivamente. Finalmente se determinó una actividad enzimática a pH 6, 80°C, empleando como sustrato una solución de almidón de 0.1% p/v, correspondiente a 1.677 UmL-1 con el método de DNS y de 7.709 UmL-1 con el método de Lugol, resultados que se compararon.
dc.description.abstractenglishThe enzyme α-amylase represents about 25-30% of the total enzyme production in the world and, like starch, is extensively used in the food, paper, textile and detergent industries, among others. In this paper, the standardization of Lugol's method for the determination of the enzymatic activity of α-amylase using UV-Vis spectroscopy. For this purpose, the study of the preparation of the Lugol's reagent, the iodine-starch complex and their linearity, was carried out; therefore, the calibration curve was developed using 10µL of the Lugol's reagent at an iodine concentration of 0. 658 M (1.5 %p/v of I2 and 10%p/v of KI) and 2.99 mL of starch solutions at concentrations 0.0025, 0.005, 0.0075, 0.01 %p/v, made from a 0.02 %p/v stock solution; the absorbance was measured at 570 nm. Consequently, extraction of the enzyme α-amylase from Zea Mays L ICA V[1]305 grains was performed and 1 mL of the crude extract, with a protein concentration of 12.51 µg/mL, was employed to evaluate the effect of pH and temperature; consequently, an optimum pH and temperature of 6 and 80°C, respectively, were obtained. In addition, at their optimum conditions, the kinetic constants Km and Vmax were evaluated, for which a value of 0.04624 %p/v and 1.497 %p/v.min-1 were obtained, respectively. Finally, enzyme activity was determined at pH 6, 80°C, using as substrate a starch solution of 0.01%p/v, and corresponding to 1.677 UmL-1 with the DNS method and 7.709 UmL-1 with the Lugol's method, results were compared.
dc.description.degreelevelPregrado
dc.description.degreenameQuímico
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.instnameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourlhttps://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.urihttps://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/11259
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Industrial de Santander
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias
dc.publisher.programQuímica
dc.publisher.schoolEscuela de Química
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coarhttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
dc.rights.licenseAttribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectα-amilasa
dc.subjectMétodo de Lugol
dc.subjectAlmidón
dc.subjectActividad enzimática
dc.subject.keywordα-amylase
dc.subject.keywordLugol's method
dc.subject.keywordStarch
dc.subject.keywordEnzymatic Activity
dc.titleEstandarización del método de Lugol-carbohidrato para la evaluación de la actividad enzimática de α-amilasa de Zea mays L.
dc.title.englishStandardization of the Lugol-carbohydrate method for the evaluation of the enzymatic activity of α-amylase from Zea mays L.
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.hasversionhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.localTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
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Química