Estudio proteómico de staphylococcus aureus resistente a meticilina (sarm) y escherichia coli o157:h7 frente a la acción del péptido sintético antimicrobiano p19 en forma libre y nanoencapsulado
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Date
2018
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Universidad Industrial de Santander
Abstract
Escherichia coli y Staphylococcus aureus Resistente a la Meticilina (SARM) están entre las bacterias con las tasas más altas de resistencia antibiotica, que representan la mayor amenaza para la salud pública mundial según la OMS. En este sentido, los Péptidos Antimicrobianos (PAMs) son una opción terapéutica prometedora frente a la proliferación de patógenos resistentes, debido a su acción antibacterial rápida y directa. En este trabajo se estudió el perfil proteómico de E. coli O157:H7 y SARM sensible y resistente al péptido sintético P19 libre y nanoencapsulado, el cual fue escogido como péptido modelo debido a su gran actividad antibacteriana frente a SARM y E. coli. El péptido P19 fue diseñado y sintetizado en fase sólida empleando la estrategia Fmoc/tBu. Posteriormente, fue encapsulado en PLGA (NPP19) por el método de DES-D, las NPP19 fueron caracterizadas por DLS, se encontraron tamaños hidrodinámicos de 292,3 ± 3,67nm y porcentaje de encapsulamiento superior al 90,5 ±0,9%. La CMI50 del péptido P19 libre contra E. coli O157:H7 y SARM fue de 12.5 y 1.5 µM respectivamente, mientras que para el NPP19 fue 4 veces superior (3.13 µM) en E. coli y 2 veces superior (0.7 µM) para SARM. Finalmente, se analizaron los cambios en el perfil proteómico por medio de 2D-PAGE y MALDI-TOF en E. coli O157:H7 y SARM tratadas con el PAM libre y nanoencapsulado. Por medio de esta metodología, se logró identificar un posible balnco de acción del P19 a nivel celular, inhibiendo la proteína murG, la cual es una glucosiltransferasa bacterial que está involucrada en la biosíntesis de péptidoglicano. Esta enzima está presente en todos los organismos que sintetizan peptidoglicano y es uno de los principales objetivos para el diseño de nuevos antibióticos. Sin embargo, estos resultados deben corroborarse por medio de técnicas moleculares complementarias.
Description
Keywords
Proteomica, Escherichia Coli, Staphylococcus Aureus, Nanopartículas, Péptidos Antimicrobianos, Resistencia Antibiótica.