"monitoreo por maldi-tof ms del proceso de síntesis en fase solida del péptido conopresina presente en el veneno de conus textile"

Abstract

El péptido fue sintetizado con conopressin aminoacídica CFIRNCPP secuencia localizada en la industria textil caracol Conus veneno. Tiene un enlace disulfuro entre las cisteínas en las posiciones 1-6. El enlace disulfuro proporciona a la formación de la estructura tridimensional, que desempeñan un papel importante en la actividad biológica dando todas las características agonista de oxitocina. La síntesis conopéptido se completó mediante una síntesis metodológica en fase sólida (SPPS), utilizando una estrategia de N-Fmoc, es decir, el grupo 9-fluoromethoxycarbonyl como un protector temporal de -amino y terc-butil (tBu) tipo grupos para proteger las cadenas laterales de los aminoácidos trifuncionales. protección cisteínas se llevó a cabo con tritely (trt). La formación de enlaces disulfuro se realiza a través de diferentes métodos, de hecho, DMSO oxidación en tampón fosfato con 7,5 pH era el más eficiente. El seguimiento de síntesis de péptidos y de la formación de enlaces disulfuro se realizan a través de MALDI-TOF espectrometría de masas y, finalmente, la técnica analítica RP-HPLC se empleó usando una columna C18 de gradiente de acetonitrilo (ACN) / agua. La técnica analítica espectrometría de masas MALDI-TOF permitió realizar un monitoreo adecuado de cada acople para mejorar el proceso de síntesis y evitar la formación de deleciones. El método de oxidación elegido, empleando DMSO a pH básico, fue el más adecuado para la formación del enlace disulfuro de las posiciones 1- 6 en la conopresina textile, ya que se dio una conversión completa del péptido lineal al péptido cíclico.