Marcadores de apoptosis en leishmania panamensis inducidos por la terapia fotodinámica utilizado ftalocianina de aluminio clorada como fotosensibilizador

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dc.contributor.advisorEscobar Rivero, Patricia
dc.contributor.authorValdivieso Quintero, Wilfredo
dc.date.accessioned2024-03-03T18:11:04Z
dc.date.available2010
dc.date.available2024-03-03T18:11:04Z
dc.date.created2010
dc.date.issued2010
dc.description.abstractLa muerte celular programada es un proceso altamente regulado descrito en células de mamífero y organismos unicelulares. Diferentes compuestos con actividad anti-Leishmania inducen la expresión de marcadores de apoptosis. El tratamiento fotodinámico (TFD) utilizando ftalocianina de aluminio clorada (PcAlCl) ha mostrado efectividad contra diferentes especies de Leishmania. El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto del TFD con PcAlCl en la expresión de marcadores de apoptosis en promastigotes y amastigotes intracelulares de L. panamensis. Se determinó la internalización y localización intracelular de la PcAlCl por microscopia confocal y la actividad de los compuestos luego del TDF por microscopía luz y por MTT. Se determinaron la expresión de marcadores de muerte celular 0, 6,1 2 y 24 horas post irradiación. Los cambios morfológicos se determinaron por microscopia luz, la actividad mitocondrial, expresión de fosfatidilserina y fragmentación del ADN por fluorescencia y/o electroforesis y la actividad de caspasa 3 por una prueba colorimétrica. La PcAlCl fue internalizada en promastigotes y en células THP-1 y se encontró localización mitocondrial en las células THP-1. La susceptibilidad al TFD fue observada en los promastigotes con CC90= 0,14± 0.02µM y en los amastigotes la muerte se presentó a la par con la muerte de la célula hospedera en concentraciones superiores a 0,18 µM. Se observaron cambios morfológicos asociados con apoptosis (diminución del tamaño celular y pérdida del núcleo y el kinetoplasto) y fragmentación del ADN luego del TFD en promastigotes y amastigote intracelulares. Adicionalmente en promastigotes se observaron otros marcadores como la expresión de fosfatidilserina y pérdida de la actividad mitocondrial, pero no se observó actividad de caspasa 3. La expresión de los marcadores de apoptosis observados aumentó con el paso del tiempo. Este estudio muestra que promastigotes y amastigotes intracelulares de L. panamensis son susceptibles al TFD y que la muerte por este tratamiento induce la expresión de marcadores de apoptosis sin la activación de enzimas con actividad de caspasa 3.
dc.description.abstractenglishProgrammed cell death is a highly regulated process described in mammalian cells and protozoa. Different compounds with anti-Leishmania activity induce the apoptosis markers expression. Photodynamic therapy (PDT) using aluminum phthalocyanine chloride (PcAlCl) has shown effectiveness against different species of Leishmania. The aim of this study was to determine the effect of PDT-PcAlCl in the expression of markers of apoptosis in promastigotes and intracellular amastigotes of L. panamensis. We determined the internalization and intracellular localization of PcAlCl by confocal microscopy and the compounds activity after the PDT by light microscopy and MTT. We determined the expression of markers of cell death 0, 6.1 2 and 24 hours post irradiation. Morphological changes were determined by light microscopy, mitochondrial activity, expression of phosphatidylserine and DNA fragmentation by fluorescence and / or electrophoresis and caspase 3 activity by a colorimetric test. The PcAlCl was internalized in promastigotes and THP-1 cells and mitochondrial localization was found in THP-1 cells. The susceptibility to PDT was observed in promastigotes with CC90= 0.14 ± 0.02 M and the amastigotes death appeared r with the host cell death at concentrations above 0.18 M. There were morphological changes associated with apoptosis (decrease in cell size and loss of nucleus and kinetoplasto) and DNA fragmentation after PDT in promastigotes an intracellular amastigotes. Additionally, other apoptosis markers were observed in promastigotes as the expression of phosphatidylserine and loss of mitochondrial activity, but there was no caspase 3 activity. The expression of apoptosis observed increased with time. This study shows that promastigotes and intracellular amastigotes of L. panamensis are susceptible to PDT and that death by this treatment induces the expression of apoptosis without the activation of enzymes with caspase 3.
dc.description.degreelevelMaestría
dc.description.degreenameMagíster en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.instnameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourlhttps://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.urihttps://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/23931
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Industrial de Santander
dc.publisher.facultyFacultad de Salud
dc.publisher.programMaestría en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.publisher.schoolEscuela de Bacteriología y Laboratorio Clínico
dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
dc.rights.licenseAttribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0
dc.subjectApoptosis
dc.subjectTerapia fotodinámica
dc.subjectMuerte celular
dc.subjectLeishmania.
dc.subject.keywordApoptosis
dc.subject.keywordPhotodynamic therapy
dc.subject.keywordCellular death
dc.subject.keywordLeishmania
dc.titleMarcadores de apoptosis en leishmania panamensis inducidos por la terapia fotodinámica utilizado ftalocianina de aluminio clorada como fotosensibilizador
dc.title.englishApoptosis markers in leishmania panamensis induced by phtodynamic treatment using aluminun chloride phthalocyanine as photosensitizer
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.hasversionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc
dc.type.localTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestria
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