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Evaluacion del estado de metilacion de adn en cultivos primarios de celulas epiteliales gastricas humanas sanas infectadas con helicobacter pylori(atcc 43504)

Resumen

Helicobacter pylori es un patógeno clasificado como agente cancerígeno clase I por la agencia Internacional de Investigación sobre el cáncer. La bacteria ocasiona metilación de ADN en múltiples genes supresores tumorales (GST) de células epiteliales gástricas. Esta metilación es inducida por dos mecanismos: un efecto directo mediado por componentes bacterianos y un efecto indirecto desencadenado por la respuesta inmune. No obstante, en la actualidad no hay consenso si los cambios epigenéticos son producto de la acción de un mecanismo en particular o la combinación de los mismos. Cultivos primarios de células epiteliales gástricas del antro de un donante sano fueron infectadas con H. pylori (ATCC 43504) a una multiplicidad de infección de 100. La infección fue monitoreada durante 24, 48, 72 h y 7 días; garantizando la viabilidad, disponibilidad de nutrientes de las células y las bacterias. El estado de metilación de tres GST (CDKN2A, CDH1 y hMLH1) ampliamente reportados en cáncer gástrico se evaluaron con PCR metilación específica y el estado de metilación global se determinó mediante un inmunoensayo (ELISA). Control se usaron células tumorales gástricas (AGS). Los resultados obtenidos evidenciaron que la infección de células gástricas primarias y tumorales con H. pylori (ATCC 43504), en los tiempos de incubación evaluados de hasta siete días, no indujo cambios en el estado de metilación de los tres GST evaluados. No se observó diferencias en los porcentajes de metilación global de las células gástricas primarias y tumorales infectadas y sin infectar. Por tanto, los anteriores resultados sugieren que los cambios epigenéticos observados durante la infección de H. pylori en la carcinogénesis gástrica podrían ser producto de la respuesta inmune y no del efecto directo de la bacteria sobre las células gástricas. * Tesis de grado ** Facultad de Salud. Escuela de Medicina. Maestría en Ciencias Básicas Biomédicas. Director de Tesis: Henry Bautista Amorocho Bact. MsC, PhD (c). Codirectora de tesis: Clara Inés Vargas, MD,