Detección rápida de staphylococcus aureus usando un biosensor electroquímico basado en electrodos serigrafiados de oro modificados con cisteína y peroxidasa de pasto guinea (panicum máximum)
No Thumbnail Available
Date
2020
Authors
Evaluators
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad Industrial de Santander
Abstract
La presencia de bacterias patógenas en alimentos y/o aguas de consumo humano representan un problema de salud pública a nivel mundial debido al elevado número de muertes que causa al año. Existe un enorme interés en el desarrollo de metodologías analíticas novedosas y confiables que permitan llevar a cabo diagnósticos rápidos, in situ y confiables como los biosensores electroquímicos. En este trabajo se presenta un biosensor para la determinación rápida de Staphylococcus aureus mediante el consumo de peróxido de hidrógeno (H2O2) por parte de las catalasas presentes en S. aureus y detectado por electrodos de oro modificados con peroxidasa de pasto guinea (Panicum maximum).
El trabajo se desarrolló en cuatro etapas: la primera consistió en la extracción y semipurificación de la enzima donde se obtuvo un extracto con actividad volumétrica de 470 U/mL. La segunda etapa consistió en la inmovilización del extracto enzimático sobre electrodos serigrafiados de oro usando cisteína como agente entrecruzante. En la tercera etapa se realizó la caracterización de los electrodos modificados mediante voltamperometría cíclica. Finalmente, en la cuarta etapa se evaluó la respuesta del biosensor enzimático en diferentes concentraciones de S. aureus presentando una relación lineal entre la corriente y la concentración de bacterias en un intervalo de 3x102-3x108 UFC/mL a un potencial de trabajo de -810mV. Además, fue posible detectar la presencia de la bacteria en muestras de leche comercial contaminadas con el microrganismo. Esto indica que el biosensor fabricado puede convertirse en una potencial herramienta analítica para la detección rápida de bacterias en alimentos.
Description
Keywords
Biosensor, Peroxidasa de pasto guinea, Cisteína, Voltamperometría ciclica, Staphylocaccus aureus.