Síntesis de péptidos sintéticos con posible actividad antimicrobiana y estudio de su mecanismo de acción frente a escherichia coli o157:h7 y staphylococcus aureus resistente a meticilina (sarm)
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Date
2015
Authors
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Publisher
Universidad Industrial de Santander
Abstract
En este trabajo de investigación se llevó a cabo el diseño y la síntesis de ocho péptidos con posible actividad antibiótica frente a frente a E. coli O157:H7 y SARM. Los péptidos antimicrobianos (PAMs) se sintetizaron en fase sólida empleando la estrategia Fmoc (9-fluorenilmetoxicarbonilo). Los PAMs se obtuvieron con una pureza del 95% y un perfil típ-Hélice, de acuerdo con los espectros de dicroísmo circular. Posteriormente se evalúo la actividad antimicrobiana de los péptidos sintetizados frente a E. coli O157:H7 y SARM, las secuencias que exhibieron las actividades antimicrobianas más altas fueron encapsuladas en nanopartículas de PLGA y evaluados nuevamente frente a E.coli O157:H7 y SARM. Los péptidos nanoestructurados se caracterizaron mediante Microscopía Electrónica de Barrido en modo de Transmisión (STEM), Dispersión de Luz Dinámica (DLS) y RP-HPLC. El péptido encapsulado M3 alcanzó una CMB de 25µM frente a SARM, mientras el péptido encapsulado M7 exhibió una CMI90 de 50 µM frente a E.coli O157:H7. Finalmente se analizó la interacción de los péptidos sintéticos con las membranas bacterianas mediante Microscopia Confocal y ensayos de integridad de la membrana interna, los resultados obtenidos muestran la permeabilización de la membrana bacteriana e indican que los PAMs sintetizados nanoestructurados se constituyen en una alternativa viable para enfrentar el desafío de la resistencia bacteriana.
Description
Keywords
Péptidos Antimicrobianos, E. Coli O157:H7, Sarm, Nanoprecipitación, Encapsulación.