Estudio metabolómico de la reexpresión de interferón kappa en modelos celulares in vitro de cáncer de cuello uterino infectados con virus del papiloma humano

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dc.contributor.advisorHidalgo Bucheli, William Fernando
dc.contributor.advisorRincón Orozco, Bladimiro
dc.contributor.authorSierra Guevara, Leidy Tatiana
dc.contributor.evaluatorDaza Espinosa, Martha Cecilia
dc.contributor.evaluatorMendez Sanchez, Stelia Carolina
dc.date.accessioned2023-08-15T21:28:35Z
dc.date.available2023-08-15T21:28:35Z
dc.date.created2023-08-14
dc.date.issued2023-08-14
dc.description.abstractLos Virus del Papiloma Humano (VPH) modulan procesos inmunológicos en queratinocitos y reconfiguran su metabolismo celular, favoreciendo la propagación viral, el desarrollo tumoral y la resistencia a tratamientos. Los responsables son los oncogenes E6 y E7, ya que inhiben la expresión de interferones tipo I como el IFN-k, ocasionando una proliferación descontrolada de los queratinocitos infectados, que desencadenan el cáncer de cuello uterino (CCU). A nivel mundial, el CCU genera más de 300.000 muertes anuales y en Colombia se registran más de 2.500 casos anuales con un 50 % de mortalidad en estadios muy avanzados. Los queratinocitos expresan constitutivamente el IFN-k como respuesta ante patógenos. Sin embargo, en los queratinocitos infectados con VPH se inhibe la expresión de está citoquina, ocasionando cambios inmunometabólicos, que hasta el momento no son bien comprendidos. Por tal motivo, en la presente investigación se realizó un estudio metabólico de la reexpresión del IFN-k en una línea celular cervical tumoral (SiHa) y en un queratinocito no tumoral (HaCat). La reexpresión del IFN-k se realizó por transfección química y se comprobó por retrotranscripción (RT-PCR) y cuantificación absoluta por ddPCR, para posterior análisis metabólico mediante UHPLC-Orbitrap/HRMS, procesamiento estadístico de datos e identificación de los metabolitos de interés. Finalmente, se identificaron diferencias en los perfiles metabólicos entre las células control (sin transfección y mock) y tratamiento (transfectadas con IFN-k). Para las células cancerígenas (SiHa) fueron representativos los cambios ocurridos en el metabolismo de fenilalanina, tirosina, triptófano, ácidos grasos y aminoacil-ARNt. En los queratinocitos no tumorales (HaCat), fueron modulados el metabolismo de fenilalanina, valina, leucina e isoleucina. Por ende, los cambios metabólicos modulados por la reexpresión del IFN-k variaron entre los controles y tratamientos de células no tumorales y cancerígenas, permitiendo la activación de respuestas inmunometabólicas que contribuyen a disminuir la proliferación de células cancerígenas cervicales.
dc.description.abstractenglishHuman Papilloma Viruses (HPV) modulate immunological processes in keratinocytes and reconfigure their cellular metabolism, favoring viral propagation, tumor development and resistance to treatment. The culprits are the E6 and E7 oncogenes, as they inhibit the expression of type I interferons such as IFN-k, causing uncontrolled proliferation of infected keratinocytes, which trigger cervical cancer (CCU). Worldwide, cervical cancer causes more than 300.000 deaths per year and in Colombia there are more than 2.500 cases per year with a 50% mortality rate in very advanced stages. Keratinocytes constitutively express IFN-k in response to pathogens. However, in keratinocytes infected with HPV the expression of this cytokine is inhibited, causing immunometabolic changes, which so far are not well understood. For this reason, in the present investigation we performed a metabolic study of IFN-k reexpression in a cervical tumor cell line (SiHa) and in a non-tumorigenic keratinocyte (HaCat). IFN-k re-expression was performed by chemical transfection and tested by retrotranscription (RT-PCR) and absolute quantification with ddPCR, for subsequent metabolic analysis by UHPLC-Orbitrap/HRMS, statistical data processing and identification of metabolites of interest. Finally, differences in metabolic profiles were identified between control (untransfected and mock) and treatment (transfected with IFN-k) cells. For cancer cells, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, fatty acid and aminoacyl-tRNA metabolism were representative. In non-tumorigenic keratinocytes, phenylalanine, valine, leucine, isoleucine metabolism were characteristic. Thus, metabolic changes modulated by IFN-k re-expression varied between non-tumor and cancer cell controls and treatments, allowing for the activation of immunometabolic responses that contribute to decreased cervical cancer cell proliferation.
dc.description.degreelevelPregrado
dc.description.degreenameQuímico
dc.description.orcidhttps://orcid.org/0000-0001-9789-2225
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.instnameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourlhttps://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.urihttps://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/14872
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Industrial de Santander
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias
dc.publisher.programQuímica
dc.publisher.schoolEscuela de Química
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coarhttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
dc.rights.licenseAttribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectCáncer cervicouterino
dc.subjectVPH
dc.subjectInterferón tipo I
dc.subjectQueratinocitos epidérmicos
dc.subjectSiHa
dc.subjectHaCat
dc.subjectADN recombinante
dc.subjectTransfección
dc.subjectMetabolómica
dc.subject.keywordCervical cancer
dc.subject.keywordHPV
dc.subject.keywordType I interferon
dc.subject.keywordEpidermal keratinocytes
dc.subject.keywordSiHa
dc.subject.keywordHaCat
dc.subject.keywordRecombinant DNA
dc.subject.keywordTransfection
dc.subject.keywordMetabolomics
dc.titleEstudio metabolómico de la reexpresión de interferón kappa en modelos celulares in vitro de cáncer de cuello uterino infectados con virus del papiloma humano
dc.title.englishMetabolomic study of interferon kappa reexpression in cervical cancer cell models in vitro infected with human papillomavirus
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.hasversionhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.localTesis/Trabajo de grado - Monografía - Pregrado
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