Evaluación de la aptitud biológica asociada a los genes beta-2 tubulin / doublesex-dsx de individuos silvestres de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) de los municipios de Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander)
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Date
2024-02-15
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Universidad Industrial de Santander
Abstract
Se evaluó la aptitud biológica asociada a la variabilidad genética de los fragmentos de los genes beta 2-tubulin y doublesex de individuos silvestres de Aedes aegypti comparados con una cepa de laboratorio, para identificar aquellos en los cuales implementar técnica de insecto estéril guiada con precisión. Se recolectaron huevos de A. aegypti con trampas de oviposición en los municipios Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander). Para establecer colonias, las hembras de cada municipio se alimentaron con sangre de rata albina Wistar y se mantuvieron en jaulas de cría. La caracterización molecular de los especímenes involucró la extracción, amplificación y secuenciación por Sanger de ADN de 18 individuos de A. aegypti silvestres y dos de la cepa control. El porcentaje de similitud de las secuencias se evaluó por medio de BLAST. Para evaluar la homología de los sitios codificantes se realizó alineamiento de las secuencias con el algoritmo CLUSTALW en Benchling y se representaron los sitios polimórficos en MEGA. Posteriormente, se realizó un análisis filogeográfico para identificar grupos genéticos en los individuos con método bayesiano y coalescente, *BEAST. Para la evaluación de la aptitud biológica, se tomaron y compararon los parámetros de desarrollo larva hasta pupa, pupa hasta adulto, fecundidad, fertilidad y longevidad en las colonias establecidas en laboratorio. Los datos se analizaron con la prueba de Kruskal Wallis y su prueba Post Hoc Dunn y ANOVA con su prueba post hoc Tukey. El gen beta 2-tubulin de los individuos silvestres de A. aegypti comparten homología en las regiones codificantes con el gen objetivo. Se encontró una mutación no silenciosa en un individuo macho del municipio de Bucaramanga en el fragmento del gen doublesex, No hay diferencias estadísticamente significativas en los parámetros de aptitud biológica evaluados entre los individuos silvestres, pero sí de estos respecto al control (p < 0.01). Los resultados indican que los individuos silvestres de A. aegypti de los municipios de Floridablanca y Piedecuesta sirven como plataforma en la creación de líneas modificadas genéticamente que serán utilizadas para crear el insecto estéril.
Description
Keywords
Aedes aegypti, Aptitud biológica, Caracterización genómica, Control vectorial, CRISPR/Cas9, pgSIT