Evaluación de la aptitud biológica asociada a los genes beta-2 tubulin / doublesex-dsx de individuos silvestres de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) de los municipios de Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander)

Cáceres Ayala, José Arsenio

Evaluación de la aptitud biológica asociada a los genes beta-2 tubulin / doublesex-dsx de individuos silvestres de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) de los municipios de Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander)

dc.contributor.advisor	Duque Luna, Jonny Edward
dc.contributor.advisor	Rengifo Correa, Laura Alexandra
dc.contributor.author	Cáceres Ayala, José Arsenio
dc.contributor.evaluator	Castellanos Vargas, Clara Inés
dc.contributor.evaluator	Aguirre Obando, Óscar Alexander
dc.date.accessioned	2024-02-21T15:53:15Z
dc.date.available	2024-02-21T15:53:15Z
dc.date.created	2024-02-15
dc.date.issued	2024-02-15
dc.description.abstract	Se evaluó la aptitud biológica asociada a la variabilidad genética de los fragmentos de los genes beta 2-tubulin y doublesex de individuos silvestres de Aedes aegypti comparados con una cepa de laboratorio, para identificar aquellos en los cuales implementar técnica de insecto estéril guiada con precisión. Se recolectaron huevos de A. aegypti con trampas de oviposición en los municipios Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander). Para establecer colonias, las hembras de cada municipio se alimentaron con sangre de rata albina Wistar y se mantuvieron en jaulas de cría. La caracterización molecular de los especímenes involucró la extracción, amplificación y secuenciación por Sanger de ADN de 18 individuos de A. aegypti silvestres y dos de la cepa control. El porcentaje de similitud de las secuencias se evaluó por medio de BLAST. Para evaluar la homología de los sitios codificantes se realizó alineamiento de las secuencias con el algoritmo CLUSTALW en Benchling y se representaron los sitios polimórficos en MEGA. Posteriormente, se realizó un análisis filogeográfico para identificar grupos genéticos en los individuos con método bayesiano y coalescente, *BEAST. Para la evaluación de la aptitud biológica, se tomaron y compararon los parámetros de desarrollo larva hasta pupa, pupa hasta adulto, fecundidad, fertilidad y longevidad en las colonias establecidas en laboratorio. Los datos se analizaron con la prueba de Kruskal Wallis y su prueba Post Hoc Dunn y ANOVA con su prueba post hoc Tukey. El gen beta 2-tubulin de los individuos silvestres de A. aegypti comparten homología en las regiones codificantes con el gen objetivo. Se encontró una mutación no silenciosa en un individuo macho del municipio de Bucaramanga en el fragmento del gen doublesex, No hay diferencias estadísticamente significativas en los parámetros de aptitud biológica evaluados entre los individuos silvestres, pero sí de estos respecto al control (p < 0.01). Los resultados indican que los individuos silvestres de A. aegypti de los municipios de Floridablanca y Piedecuesta sirven como plataforma en la creación de líneas modificadas genéticamente que serán utilizadas para crear el insecto estéril.
dc.description.abstractenglish	The biological fitness associated with the genetic variability of fragments of the beta 2-tubulin and the doublesex genes of wild individuals of Aedes aegypti was evaluated and compared with the laboratory strain, to identify those individuals with optimal features to implement the precision-guided sterile insect technique. Aedes aegypti eggs were collected with oviposition traps in Bucaramanga, Floridablanca, and Piedecuesta (Santander) municipalities. To establish colonies, females from each municipality were fed with Wistar albino rat blood and kept in breeding cages. The molecular characterization of the specimens involved the extraction, amplification and Sanger sequencing of DNA from 18 wild A. aegypti individuals and two from the laboratory strain. The percentage of similarity from the sequences was evaluated by BLAST. To evaluate the homology of the coding sites, sequence alignment was carried out with the CLUSTALW algorithm in Benchling, and polymorphic sites were schematized with MEGA. To identify genetic groups of individuals, phylogeographic analysis was performed using a Bayesian and a coalescent method, *BEAST. For the evaluation of biological fitness, the parameters of development from larva to pupa, pupa to adult, fecundity, fertility and longevity were taken and compared in the colonies established in the laboratory. The data were analyzed with the Kruskal Wallis test and its Post Hoc Dunn test and ANOVA with its Tukey post hoc test. The beta 2-tubulin gene from wild individuals of A. aegypti shares homology in the coding regions with the target gene. A non-silent mutation was found in a male individual from the municipality of Bucaramanga in the doublesex gene fragment. There are no statistically significant differences in the biological fitness parameters evaluated among the wild individuals, but there are differences between them compared to the control (p < 0.01). The results indicate that wild individuals of A. aegypti from the municipalities of Floridablanca and Piedecuesta serve as a platform for the creation of genetically modified lines that will be used to create the sterile insect.
dc.description.cvlac	https://scienti.minciencias.gov.co/cvlac/visualizador/generarCurriculoCv.do?cod_rh=0001785924
dc.description.degreelevel	Maestría
dc.description.degreename	Magíster en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.identifier.instname	Universidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponame	Universidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourl	https://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.uri	https://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/15760
dc.language.iso	spa
dc.publisher	Universidad Industrial de Santander
dc.publisher.faculty	Facultad de Salud
dc.publisher.program	Maestría en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.publisher.school	Escuela de Medicina
dc.rights	info:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.coar	http://purl.org/coar/access_right/c_abf2
dc.rights.license	Atribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Colombia (CC BY-NC-ND 2.5 CO)
dc.rights.uri	http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subject	Aedes aegypti
dc.subject	Aptitud biológica
dc.subject	Caracterización genómica
dc.subject	Control vectorial
dc.subject	CRISPR/Cas9
dc.subject	pgSIT
dc.subject.keyword	Aedes aegypti
dc.subject.keyword	Biological Fitness
dc.subject.keyword	Genomic Characterization
dc.subject.keyword	Vector Control
dc.subject.keyword	CRISPR/Cas9
dc.subject.keyword	pgSIT
dc.title	Evaluación de la aptitud biológica asociada a los genes beta-2 tubulin / doublesex-dsx de individuos silvestres de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) de los municipios de Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander)
dc.title.english	Evaluation of the Biological Fitness Associated with the Beta-2 Tubulin / Doublesex-dsx Genes of Wild Individuals of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) from the Municipalities of Bucaramanga, Floridablanca and Piedecuesta (Santander)
dc.type.coar	http://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc
dc.type.hasversion	http://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.local	Tesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestría