Evaluación in vitro del efecto de la inhibición del oncogen evi1 en un modelo murino de lma-evi1+

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dc.contributor.advisorArteaga Narváez, Herman Jose
dc.contributor.advisorCardona, Maria Eugenia
dc.contributor.authorSilva Lara, Maria Fernanda
dc.date.accessioned2024-03-03T19:38:49Z
dc.date.available2012
dc.date.available2024-03-03T19:38:49Z
dc.date.created2012
dc.date.issued2012
dc.description.abstractLa sobre-expresión de EVI1 es un indicador de mal pronóstico en leucemia mieloide aguda (LMAEVI1+ ). EVI1 es un factor de transcripción, esencial para el mantenimiento de las células madres hematopoyéticas y está involucrado en funciones leucogénicas. Se ha sugerido que EVI1 es un factor esencial, pero no suficiente para el desarrollo de LMA-Evi1+ . Recientemente, hemos desarrollado un modelo murino de LMA-Evi1+ , partiendo de una línea celular no trasplantable, dependiente de GM-CSF (DA-3 dep), con sobre-expresión de Evi1 como única lesión génica preleucémica. Esta línea es expandible en animales en condiciones de inflamación y la generación de una línea descendente independiente de factores de crecimiento (DA-3 ind) con fenotipo tumoral. Utilizando vectores de expresión constitutiva portadores de shRNA con secuencias de ARNi contra Evi1, de una eficiencia inhibitoria superior al 90%, evaluada en experimentos de cotransfección con plásmidos portadores del gen de fusión Evi1-d2GFP, hemos generado líneas celulares derivadas de las células DA-3 dep y DA-3 ind que expresan establemente ARNi contra Evi1. Estas líneas mostraron niveles de Evi1 de menos del 50% y patrones de proliferación no muy diferentes a las células parentales pero con sensibilidad al efecto citotóxico de clorofarabina significativamente incrementada. Estos datos en su conjunto, sugieren que en este modelo la inhibición de Evi1 niveles menores al 50% no afectan los mecanismos de proliferación, pero si incrementan la sensibilidad a la apoptosis celular. La recuperación de líneas modificadas establemente con secuencias que expresan siARN de alta eficiencia contra Evi1 y con niveles de expresión cercanos al 50% pudiera indicar que, en este tipo de células, niveles inferiores de Evi1 son letales. En resumen, estos resultados sugieren que Evi1 pudiera ser la causa de la resistencia al tratamiento de la LMA-EVI1+ y señalan a este oncogén como un posible blanco terapéutico.
dc.description.abstractenglishOverexpression of EVI1oncogene is associated with high resistance to treatment and is an indicator of poor prognosis in acute myeloid leukemia (AML-EVI1+ ). Evi1 is a transcription factor essential for the maintenance of pluripotent hematopoietic stem cells and is involved in potentially tumorogenic functions. It has been suggested that Evi1 is essential but not sufficient for the development of Evi1+ -AML. Recently, we have developed a mouse model of Evi1+ -AML from a non- transplantable growth factor-dependent cell line (DA-3 dep), with overexpression of Evi1 gene as a single preleukemic lesion. This line was allowed to expand in animals suffering of chronic inflammatory conditions from which it was possible to isolate growth factor independent cell lines (DA-3 ind) with a fully leukemic phenotype. Using vectors for constitutive expression of shRNAs carrying RNAi sequences against Evi1 with an inhibitory efficiency of more than 90%, as assessed in cotransfection experiments with plasmids carrying the fusion gene d2EGFP-Evi1, we generated cell lines derived from cells DA-3 dep and DA-3 ind stably expressing RNAi against Evi1. These cell lines showed Evi1 levels of less than 50%, but not different proliferation patterns, with respect to the parental cells. However, the new cell lines had a significantly increased sensitivity to the cytotoxic effect of clofarabine. These data suggest that, in this model, inhibition Evi1 expression to levels close to 50% did not affect the mechanisms of cell proliferation, but increase the sensitivity to apoptosis. The recovery of cell lines stably expressing highly efficient siRNA sequences against Evi1 and with levels of expression of this oncogene of around 50% could indicate that, in this type of cells, lower levels of Evi1 are lethal. In summary, these results suggest that EVI1 could be the cause of resistance to the treatment of AML-EVI1+ and signal this oncogene as a possible therapeutic target.
dc.description.degreelevelMaestría
dc.description.degreenameMagíster en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.instnameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourlhttps://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.urihttps://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/27655
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Industrial de Santander
dc.publisher.facultyFacultad de Salud
dc.publisher.programMaestría en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.publisher.schoolEscuela de Bacteriología y Laboratorio Clínico
dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
dc.rights.licenseAttribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0
dc.subjectEVI1
dc.subjectLMA
dc.subjectARNi
dc.subjectDA-3
dc.subject.keywordEVI1
dc.subject.keywordAML
dc.subject.keywordRNAi
dc.subject.keywordDA-3
dc.titleEvaluación in vitro del efecto de la inhibición del oncogen evi1 en un modelo murino de lma-evi1+
dc.title.englishIn vitro evaluation of the evi1 inhibition effect in a model of murine evi1 +aml.
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.hasversionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc
dc.type.localTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestria
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