Síntesis de posibles péptidos b-plegados nanoencapsulados con actividad antibacteriana frente a Escherichia coli o157:h7 y Staphylococcus aureus resistente a meticilina (sarm)
No Thumbnail Available
Date
2017
Authors
Evaluators
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad Industrial de Santander
Abstract
Se diseñaron in silico cuatro secuencias de péptidos con posible estructura secundaria de péptidos beta plegados y con potencial actividad antimicrobiana. Las modificaciones de W y R por aminoácido apolar / polar fueron sistemáticas. El péptido molde y su análogo fueron denominados como B1 y B2 y C1 y C2, respectivamente. Los péptidos fueron sintetizados en fase sólida usando la estrategia Fmoc. Posteriormente se modificaron los péptidos C1 y C2 favoreciendo la formación de puentes disulfuro mediante la oxidación con dimetilsulfoxido. Los péptidos moldes y sus análogos fueron purificados mediante Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia en Fase Reversa (RP-HPLC), obteniéndose una pureza superior del 90%. La estructura primaria de los péptidos fue caracterizada mediante Espectrometría de Masas y Ionización Electrospray (IES); la estructura -giro se determinó utilizando Dicroísmo Circular (DC). Posteriormente, se evaluó el efecto antibacteriano de los péptidos sintetizados frente a las cepas patógenas multiresistentes a antibióticos Escherichia coli O157: H7 (EC O157:H7) y Staphylococcus aureus Resistente a Meticilina (SARM). También se evaluó el efecto hemolítico de los mismos. Todos los péptidos sintetizados presentaron actividad antibacterial frente a las cepas evaluadas. Sin embargo, los mejores resultados se obtuvieron para los péptidos B2 y C2. En el caso de B2 se determinaron CMI99 enterobacteria y el coco Gram positivo; mientras que en el caso de C2 se obtuvieron CMI99 síntesis de C2, se trabajó con el péptido B2 para su encapsulación utilizando (PLGA). Las nanopartículas obtenidas fueron caracterizadas utilizando (DLS), (STEM) y RP-HPLC. Finalmente, se evaluaron las actividades biológicas de PLGA-PAM B2, las cuales no presentaron actividad antibacteriana frente a las dos cepas evaluadas pese a los resultados previamente obtenidos para al péptido libre
Description
Keywords
Péptidos Beta Plegados, Péptidos Antimicrobianos, Nanopartículas De Plga, Bacterias Multirresistente A Antibióticos