Síntesis de posibles péptidos b-plegados nanoencapsulados con actividad antibacteriana frente a Escherichia coli o157:h7 y Staphylococcus aureus resistente a meticilina (sarm)

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dc.contributor.advisorOrtiz López, Claudia Cristina
dc.contributor.advisorTorres Sáez, Rodrigo Gonzalo
dc.contributor.authorCastañeda Amaya, Andres Mauricio
dc.date.accessioned2024-03-03T23:33:51Z
dc.date.available2017
dc.date.available2024-03-03T23:33:51Z
dc.date.created2017
dc.date.issued2017
dc.description.abstractSe diseñaron in silico cuatro secuencias de péptidos con posible estructura secundaria de péptidos beta plegados y con potencial actividad antimicrobiana. Las modificaciones de W y R por aminoácido apolar / polar fueron sistemáticas. El péptido molde y su análogo fueron denominados como B1 y B2 y C1 y C2, respectivamente. Los péptidos fueron sintetizados en fase sólida usando la estrategia Fmoc. Posteriormente se modificaron los péptidos C1 y C2 favoreciendo la formación de puentes disulfuro mediante la oxidación con dimetilsulfoxido. Los péptidos moldes y sus análogos fueron purificados mediante Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia en Fase Reversa (RP-HPLC), obteniéndose una pureza superior del 90%. La estructura primaria de los péptidos fue caracterizada mediante Espectrometría de Masas y Ionización Electrospray (IES); la estructura -giro se determinó utilizando Dicroísmo Circular (DC). Posteriormente, se evaluó el efecto antibacteriano de los péptidos sintetizados frente a las cepas patógenas multiresistentes a antibióticos Escherichia coli O157: H7 (EC O157:H7) y Staphylococcus aureus Resistente a Meticilina (SARM). También se evaluó el efecto hemolítico de los mismos. Todos los péptidos sintetizados presentaron actividad antibacterial frente a las cepas evaluadas. Sin embargo, los mejores resultados se obtuvieron para los péptidos B2 y C2. En el caso de B2 se determinaron CMI99 enterobacteria y el coco Gram positivo; mientras que en el caso de C2 se obtuvieron CMI99 síntesis de C2, se trabajó con el péptido B2 para su encapsulación utilizando (PLGA). Las nanopartículas obtenidas fueron caracterizadas utilizando (DLS), (STEM) y RP-HPLC. Finalmente, se evaluaron las actividades biológicas de PLGA-PAM B2, las cuales no presentaron actividad antibacteriana frente a las dos cepas evaluadas pese a los resultados previamente obtenidos para al péptido libre
dc.description.abstractenglishIn this work, we design four peptides sequences with possible beta-sheet structure and potential antibacterial activity using bioinformatics tools. The W and R modifications by non-polar/polar amino acids were made systematically. The scaffold peptide and its analog were labeled as B1, B2, and C1, C2, respectively. The designed peptides were obtained by solid phase through N-9-Fluorenylmethoxycarbonyl (Fmoc) strategy; C1 and C2 were modified with disulfide bonds by oxidation with DMSO. As results, all peptides were purified by Reversed-Phase High Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC) with a purity above 90%, the primary and secondary structure were characterized by Electrospray Ionization Mass Spectrometry (ESI-MS) and circular dichroism (CD), respectively, obtaining typical beta structure. The antibacterial activity was performed against Escherichia coli O157: H7 and Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). It is interesting to note that all peptides showed antibacterial activity against both bacteria tested, however, the best data and bioactivity were obtained both B2 and C2. In case of B2 obtained a Minimal Inhibitory Concentration MIC99 < 100 M and 50 M against E. coli and SARM, while C2 got CMI99 <10 M y 5 M, respectively. However, due to low efficiency and high cost of synthesis of C2, the peptide B2 was chosen to further studies. B2 was encapsulate into Poly Lactic-co-Glycolic Acid (PLGA) nanoparticles, which were characterized by size, zeta potential, Scanning Transmission Electron Microscopy (STEM) and RP-HPLC (for loaded peptide). Finally, in comparison with free peptide, the biological activity of nanocomposite PLGA-peptide was tested finding no-activity against both bacteria
dc.description.degreelevelMaestría
dc.description.degreenameMagíster en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifier.instnameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.reponameUniversidad Industrial de Santander
dc.identifier.repourlhttps://noesis.uis.edu.co
dc.identifier.urihttps://noesis.uis.edu.co/handle/20.500.14071/37507
dc.language.isospa
dc.publisherUniversidad Industrial de Santander
dc.publisher.facultyFacultad de Salud
dc.publisher.programMaestría en Ciencias Básicas Biomédicas
dc.publisher.schoolEscuela de Bacteriología y Laboratorio Clínico
dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 4.0 Internacional (CC BY-NC-ND 4.0)
dc.rights.licenseAttribution-NonCommercial 4.0 International (CC BY-NC 4.0)
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0
dc.subjectPéptidos Beta Plegados
dc.subjectPéptidos Antimicrobianos
dc.subjectNanopartículas De Plga
dc.subjectBacterias Multirresistente A Antibióticos
dc.subject.keyword-Sheet Peptides
dc.subject.keywordAntimicrobial Peptides
dc.subject.keywordPlga Nanoparticles
dc.subject.keywordMultidrug Resistant Bacteria.
dc.titleSíntesis de posibles péptidos b-plegados nanoencapsulados con actividad antibacteriana frente a Escherichia coli o157:h7 y Staphylococcus aureus resistente a meticilina (sarm)
dc.title.englishSynthesis of possibles -folded peptides nanoencapsulated with antibacterial activity against escherichia coli o157: h7 and staphylococcus aureus methicillin-resistant
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/version/c_b1a7d7d4d402bcce
dc.type.hasversionhttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc
dc.type.localTesis/Trabajo de grado - Monografía - Maestria
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