Maestría en Ciencias Básicas Biomédicas
Permanent URI for this collection
Browse
Browsing Maestría en Ciencias Básicas Biomédicas by browse.metadata.advisor "Duque Luna, Jonny Edward"
Now showing 1 - 5 of 5
Results Per Page
Sort Options
Item Evaluación de la aptitud biológica asociada a los genes beta-2 tubulin / doublesex-dsx de individuos silvestres de Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) de los municipios de Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander)(Universidad Industrial de Santander, 2024-02-15) Cáceres Ayala, José Arsenio; Duque Luna, Jonny Edward; Rengifo Correa, Laura Alexandra; Castellanos Vargas, Clara Inés; Aguirre Obando, Óscar AlexanderSe evaluó la aptitud biológica asociada a la variabilidad genética de los fragmentos de los genes beta 2-tubulin y doublesex de individuos silvestres de Aedes aegypti comparados con una cepa de laboratorio, para identificar aquellos en los cuales implementar técnica de insecto estéril guiada con precisión. Se recolectaron huevos de A. aegypti con trampas de oviposición en los municipios Bucaramanga, Floridablanca y Piedecuesta (Santander). Para establecer colonias, las hembras de cada municipio se alimentaron con sangre de rata albina Wistar y se mantuvieron en jaulas de cría. La caracterización molecular de los especímenes involucró la extracción, amplificación y secuenciación por Sanger de ADN de 18 individuos de A. aegypti silvestres y dos de la cepa control. El porcentaje de similitud de las secuencias se evaluó por medio de BLAST. Para evaluar la homología de los sitios codificantes se realizó alineamiento de las secuencias con el algoritmo CLUSTALW en Benchling y se representaron los sitios polimórficos en MEGA. Posteriormente, se realizó un análisis filogeográfico para identificar grupos genéticos en los individuos con método bayesiano y coalescente, *BEAST. Para la evaluación de la aptitud biológica, se tomaron y compararon los parámetros de desarrollo larva hasta pupa, pupa hasta adulto, fecundidad, fertilidad y longevidad en las colonias establecidas en laboratorio. Los datos se analizaron con la prueba de Kruskal Wallis y su prueba Post Hoc Dunn y ANOVA con su prueba post hoc Tukey. El gen beta 2-tubulin de los individuos silvestres de A. aegypti comparten homología en las regiones codificantes con el gen objetivo. Se encontró una mutación no silenciosa en un individuo macho del municipio de Bucaramanga en el fragmento del gen doublesex, No hay diferencias estadísticamente significativas en los parámetros de aptitud biológica evaluados entre los individuos silvestres, pero sí de estos respecto al control (p < 0.01). Los resultados indican que los individuos silvestres de A. aegypti de los municipios de Floridablanca y Piedecuesta sirven como plataforma en la creación de líneas modificadas genéticamente que serán utilizadas para crear el insecto estéril.Item Manifestaciones semioquimicas y mecanismo de acción de salvia officinalis (lamiaceae) frente a stegomyia aegypti (reinert et al., 2009) (diptera : culicidae)(Universidad Industrial de Santander, 2015) Castillo Morales, Ruth Mariela; Duque Luna, Jonny Edward; Méndez Sánchez, Stelia CarolinaSe evaluó la bioactividad del aceite esencial (AE) de Salvia officinalis y su mecanismo de acción frente al mosquito vector del dengue, Stegomyia aegypti. La actividad ovicida, larvicida, pupicida, adulticida, de repelencia a la picada y acción deterrente de ovoposición fue evaluada con una colonia de S. aegypti cepa Rockefeller. Se usaron concentraciones exploratorias (CE) y concentraciones múltiples, registrando porcentajes de mortalidad a las 24 y 48 horas. La presencia de degradación de ADN total fue determinada mediante electroforesis y para la evaluación de la actividad de la enzima acetilcolinesterasa fue empleado el método de Ellman. El mecanismo de acción mitocondrial se evaluó mediante la cuantificación del Control respiratorio y actividad de las enzimas de la cadena respiratoria mitocondrial. S. officinalis mostró actividad ovicida, malformaciones en el embrión y alteración de larvas eclosionadas a todas las concentraciones evaluadas. El mayor porcentaje de actividad larvicida fue observado a las 24 horas a 63 y 76 mg.L-1 (26,7±13,4 y 36,7±18,6%). Para pupas la mayor mortalidad se registró a 310 y 390 mg.L-1 a 48 horas (88,89±1,53 y 100±0%). En adultos el mayor porcentaje de mortalidad fue a 300 mg.L-1 con 57,5±0%, el porcentaje de repelencia fue de 48±3.6% a 1000 mg.L-1 . La actividad de inhibición de la ovipostura a 200 mg.L-1 fue 97±4,81%, con un índice de actividad de oviposición (IAO): -0,94. El AE mostró inhibición de la enzima AChE y evidenció degradación de ADN total cuando se adicionó en el homogenato de larvas, indicando un posible daño en otros componentes celulares relacionados con la integridad del ADN. Las pruebas mitocondriales indicaron inhibición en el Complejo II de la cadena transportadora de electrones, alterando la producción de ATP. S. officinalis puede ser utilizado como alternativa en el control de mosquitos, al presentar efectos en todos los estadios de desarrollo y un mecanismo de acción múltiple.Item Manifestaciones semioquimicas y mecanismo de acción de thymus vulgaris (labiatae) frente a stegomyia aegypti (reinert et al. 2004) (diptera: culicidae)(Universidad Industrial de Santander, 2015) Vera Rincón, Sharon Smith; Duque Luna, Jonny Edward; Méndez Sánchez, Stelia CarolinaEl objetivo de esta disertación fue determinar el potencial insecticida del aceite esencial (AE) de T. vulgaris en S. aegypti en todas las etapas del ciclo de vida (huevo, larvas, pupas y adultos), el efecto repelente en humanos y el efecto atrayente y/o deterrente de oviposición. Adicionalmente, dilucidar el mecanismo de acción para inhibir funciones biológicas como alteración de la bioenergética mitocondrial, inhibición de la enzima acetilcolinesterasa, degradación de ADN y análisis in silico de los compuestos mayoritarios, timol y p-cimeno. Se encontró que el AE tiene acción ovicida, presentando un 50% de inhibición a una concentración de 50 mg.mL-1 ejerce actividad larvicida con una CL50= 58 y CL95= 88 mg.mL-1, presenta actividad pupicida con 63% de mortalidad a una concentración de 390 mg.mL-1 .En adultos se reportó a 1000 mg.mL-1 un 23% de mortalidad. Presentó efecto repelente en humanos contra la picadura de S. aegytpi con 37% de protección a 1000 mg.mL-1, también presenta propiedades deterrentes y disuasivas a partir de 5 mg.mL-1 con valores de 78%. A nivel mitocondrial el AE causó inhibición del complejo III, en la cadena transportadora de electrones. La concentración a la cual el AE proporcionó, una inhibición del 50% de la enzima acetilcolinesterasa (IC50) fue de 70 mg.mL-1 en ensayos in vitro y 167 mg.mL-1 para ensayos In vivo. Las larvas que se expusieron a diferentes concentraciones del AE, murieron por necrosis. El análisis in silico reveló que timol y p-cimeno presentan mayor eficiencia vía oral. Los resultados indican que el AE de T. vulgaris es un candidato promisorio para el control del vector, que puede contribuir a disminuir las poblaciones del mosquito en un futuro. ___________________________________________________________________Item Relación entre la expresión proteica total y las proteínas asociadas al mecanismo de acción en larvas de Aedes aegypti tratadas con los xenobióticos r-limoneno, s-carvona, citronelal y su mezcla(Universidad Industrial de Santander, 2021) Vanegas Estévez, Thomas Santiago; Duque Luna, Jonny Edward; Méndez Sánchez, Stelia CarolinaDebido al amplio impacto ambiental causado por los incecticidas sintéticos, la selección de ingredientes naturales para el diseño de insecticidas a partir de aceites esenciales (AE) útiles en el control de Aedes aegypti son una necesidad a causa de la escasez de productos efectivos y amigables con el medio ambiente. El objetivo de este estudio fue analizar la expresión diferencial de proteínas mitocondriales de larvas de Ae. aegypti (entre L3 y L4) tratadas con metabolitos preseleccionados con acción insecticida comprobada como Rlimoneno, Scarvona, citronelal y la mejor mezcla de los tres compuestos. Paralelamente se identifico el posible mecanismo de acción o detoxificación de estas moléculas en el insecto. Los compuestos mayoritarios fueron seleccionados por inducir concentraciones letales (CL) de CL50 ppm y también con la hipótesis que potencian el efecto insecticida a partir de su mezcla. Se expusieron larvas de Ae. aegypti a cada metabolito y con la mezcla seleccionada a concentraciones subletales (CL20). Posteriormente, se realizó electroforesis bidimensional y se analizaron las variaciones en la expresión de cada proteína (spot) empleado el programa PDQuest. Se seleccionaron las proteínas con una expresión diferenciada de mínimo 1,5 veces para el caso de sobre expresión, y máximo de 0,5 veces para regulación negativa comparando cada tratamiento con el control negativo. Se detectaron un total de 38 proteínas de interés, de las cuales la mezcla (1:1:1) presento la mayor variación, así como efectos sinérgicos y potenciadores de la acción insecticida de cada compuesto. El estudio encontró una reducción en la expresión de citocromo p450 como posible mecanismo de acción, y una sobreexpresión de peroxiredoxina6 relacionada con la detoxificación, además de otras proteínas previamente no descritas paraItem Relación entre la expresión proteica total y las proteínas asosiadas al mecanismo de acción en larvas de Aedes aegypti tratadas con los xenobióticos R-limoneno, S-carvona, citronelal y su mezcla(Universidad Industrial de Santander, 2021) Vanegas Estévez, Thomas Santiago; Méndez Sánchez, Stelia Carolina; Duque Luna, Jonny Edward; Rueda Forero, Nohora; Lucía, AlejandroDebido al amplio impacto ambiental causado por los incecticidas sintéticos, la selección de ingredientes naturales para el diseño de insecticidas a partir de aceites esenciales (AE) útiles en el control de Aedes aegypti son una necesidad a causa de la escasez de productos efectivos y amigables con el medio ambiente. El objetivo de este estudio fue analizar la expresión diferencial de proteínas mitocondriales de larvas de Ae. aegypti (entre L3 y L4) tratadas con metabolitos preseleccionados con acción insecticida comprobada como R-limoneno, S-carvona, citronelal y la mejor mezcla de los tres compuestos. Paralelamente se identifico el posible mecanismo de acción o detoxificación de estas moléculas en el insecto. Los compuestos mayoritarios fueron seleccionados por inducir concentraciones letales (CL) de CL50 ≤50 ppm y también con la hipótesis que potencian el efecto insecticida a partir de su mezcla. Se expusieron larvas de Ae. aegypti a cada metabolito y con la mezcla seleccionada a concentraciones subletales (CL20). Posteriormente, se realizó electroforesis bidimensional y se analizaron las variaciones en la expresión de cada proteína (spot) empleado el programa PDQuest. Se seleccionaron las proteínas con una expresión diferenciada de mínimo 1,5 veces para el caso de sobre expresión, y máximo de 0,5 veces para regulación negativa comparando cada tratamiento con el control negativo. Se detectaron un total de 38 proteínas de interés, de las cuales la mezcla (1:1:1) presento la mayor variación, así como efectos sinérgicos y potenciadores de la acción insecticida de cada compuesto. El estudio encontró una reducción en la expresión de citocromo p450 como posible mecanismo de acción, y una sobreexpresión de peroxiredoxina-6 relacionada con la detoxificación, además de otras proteínas previamente no descritas para este tipo de estudio.